Immunohistochemical Markers in the Differential Diagnosis of Melanoma and Nevus in Humans

SUMMARY: Immunohistochemistry allows in situ detection of cell and extracellular components through specific antibodies. The objective was to compare the immunohistochemical expression patterns of the S-100, HMB-45 and MART-1 proteins for differential diagnosis of malignant melanoma and melanocytic nevus in human skin biopsies. Thirty-nine biopsies of human tissue were used. They were divided into two groups: 19 in malignant melanoma and 20 in melanocytic nevi. Next, the samples were fixed with paraformaldehyde and processed following the protocol for inclusion. Then, immunohistochemical staining was performed. Finally, the histological and qualitative analysis of the samples was carried out. S-100, HMB-45, and MART-1 markers showed positive immunoreaction in melanoma biopsies. HMB-45 marker was generally present with weaker expression than S-100 and MART-1 in melanocytic nevus biopsies. No expression pattern was observed which specifically associates one or more markers with some types of histopathological diagnosis. Immunohistochemistry is fundamental in differential diagnosis of melanomas and melanocytic nevi. However, there is no antibody or set of antibodies which allows unequivocal diagnosis between melanoma and nevus. It is therefore necessary to analyze with care the expression pattern and location of the lesion using standard morphological characteristics.

RESUMEN: La inmunohistoquímica permite la detección in situ de componentes celulares y extracelulares a través de anticuerpos específicos. El objetivo de nuestro estudio fue comparar los patrones de expresión inmunohistoquímica de las proteínas S-100, HMB-45 y MART-1 para el diagnóstico diferencial de melanoma maligno y nevo melanocítico en biopsias de piel humana. Se utilizaron treinta y nueve biopsias de tejido humano, las que fueron divididas en dos grupos: 19 en melanoma maligno y 20 en nevos melanocíticos. A continuación, las muestras se fijaron con paraformaldehído y se procesaron siguiendo el protocolo convencional para su inclusión. Luego, se realizó la tinción inmunohistoquímica. Finalmente, se realizó el análisis histológico y cualitativo de las muestras. Los marcadores S-100, HMB- 45 y MART-1 mostraron inmunorreacción positiva en biopsias de melanoma. El marcador HMB-45 estuvo generalmente presente con una expresión más débil que S-100 y MART-1 en biopsias de nevo melanocítico. No se observó ningún patrón de expresión que asocie específicamente uno o más marcadores con algunos tipos de diagnóstico histopatológico. La inmunohistoquímica es fundamental en el diagnóstico diferencial de melanomas y nevos melanocíticos. Sin embargo, no existe ningún anticuerpo o panel de anticuerpos que permita un diagnóstico inequívoco entre el melanoma y el nevo. Por tanto, es necesario analizar con cuidado el patrón de expresión y la localización de la lesión utilizando características morfológicas estándar.

Frecuencia y procedencia del antígeno Kell en mujeres donantes de sangre durante los años 2016-2017 / Frequency and origin of the Kell antigen in female blood donors during 2016-2017

Resumen Introducción: El sistema Kell está formado por dos antígenos principales: el Kell (K) y el Cellano (k), estos son capaces de causar reacciones graves, tales como reacción hemolítica postransfusional y la enfermedad hemolítica del recién nacido. Los antígenos de este sistema son altamente inmunogénicos lo que les confiere el tercer lugar en importancia clínica. Objetivo: Determinar la frecuencia del antígeno Kell y procedencia de las mujeres donantes de sangre con antígeno Kell positivo en el Hemocentro del Centro Oriente Colombiano (HCOC). Metodología: Estudio descriptivo de corte transversal que incluyó 186 donantes voluntarias de sangre del Hemocentro Centro Oriente Colombiano, se realizó la fenotipificación del antígeno Kell, utilizando la técnica Aglutinación en lámina, la cual se basa en enfrentar glóbulos rojos del donante con anticuerpo monoclonal anti K. Se calculó la frecuencia fenotípica del antígeno Kell, en porcentajes y para el procesamiento de la información se utilizó el paquete estadístico SPSS versión 21.0 en español donde se realizó todo el análisis de los datos de la población. Resultados: Se procesaron 177 muestras obtenidas en 9 campañas de donación de sangre realizadas en diferentes municipios del departamento de Boyacá, obteniéndose una frecuencia fenotípica del 7,5% para el antígeno Kell, en la población de mujeres donantes de sangre del HCOC, siendo esta similar con la frecuencia encontrada en Colombia y Latinoamérica. Conclusión: Se determinó que la frecuencia del antígeno Kell en las mujeres donantes de sangre del HCOC fue del 7,5%, y se logró identificar que no existe una relación estadísticamente entre la procedencia y la presencia del antígeno Kell en las donantes, lo anterior está relacionado con el mestizaje y los procesos de migración.

Abstract Introduction: The Kell system consists of two major antigens: Kell (K) and Cellano (K), which are capable of causing serious reactions, such as posttransfusion hemolytic reaction and hemolytic disease of the newborn. The antigens of this system are highly immunogenic which gives them the third place in clinical importance. Objective: To determine the frequency of Kell antigen and origin of blood donors in the Hemocenter of the Centro Oriente Colombiano (H.C.O.C). Methods: Cross-sectional descriptive study involving 186 blood donors from the Centro Oriente Colombian Hemocenter, phenotyping of the Kell antigen was carried out, using the technique Aglutination in lamina, which is based on facing donor red blood cells with anti-K monoclonal antibody. Calculated the phenotypic frequency of the Kell antigen in percentages and for the processing of the information was used the statistical package SPSS version 21.0 in Spanish where all the analysis of the data of the population was carried out. Results: 177 samples obtained in 9 blood donation campaigns were carried out in different municipalities of the department of Boyacá, obtaining a phenotypic frequency of 7.5% for the Kell antigen in the population of female HCOC blood donors. Similar to the frequency found in Colombia and Latin America. Conclusion: It was determined that the frequency of Kell antigen in the female HCOC donors was 7.5%, and it was possible to identify that there is no statistically relation between the origin and the presence of Kell antigen in the donors, Is related to mestizaje and migration processes.

Frecuencia de los antígenos del sistema Rh en donantes de sangre Rh D Negativo / Frequency of the antigens of the system rh in blood donors Rh D Negative

Objetivo. Determinar la frecuencia de los antígenos del sistema Rh en donantes de sangre Rh D negativo. Materiales y métodos. Estudio retrospectivo y descriptivo donde se revisaron la totalidad de registros de donantes Rh D negativo del Banco de Sangre de Córdoba entre los años 2012-2015. Para describir las características sociodemográficas de los donantes Rh D negativo e identificar la frecuencia de los fenotipos del sistema Rh se calcularon frecuencias absolutas, relativas e intervalos de confianza para las proporciones del 95%, para comparar los fenotipos del sistema Rh de acuerdo al grupo ABO y las variables sociodemográficas se calcularon frecuencias absolutas, relativas, intervalos de confianza del 95% y la prueba Chi cuadrado En los análisis se consideraron significativos valores p < 0,05 y la información se almacenó y analizó en SPSS versión 23. Resultados. El fenotipo hallado con mayor frecuencia fue ccee, que correspondió a un 92%, los otros fenotipos se encontraron en porcentajes más bajos distribuidos de la siguiente forma: Ccee 5,9%, ccEe 1,2%, CCee 0,3%, y CcEe 0,2%. El 88% de las donaciones fueron realizadas por donantes del género masculino y se encontró que el grupo sanguíneo ABO con mayor frecuencia fue el O correspondiente a un 66,4%. Conclusiones. La frecuencia a nivel departamental coincide con los resultados encontrados a nivel nacional e internacional.

Objective. To determine the frequency of antigens of the Rh system in donors of Rh D negative blood. Materials and methods. Retrospective and descriptive study where all the records of Rh D negative blood donors from the Blood Bank of Cordoba between the years 2012-2015 were reviewed. To describe the sociodemographic characteristics of Rh D negative blood donors and to identify the frequency of phenotypes of the Rh system, absolute, relative and confidence intervals were calculated for 95% ratios to compare Rh system phenotypes according to the ABO group And sociodemographic variables, absolute, relative frequencies, 95% confidence intervals and Chi square test were calculated. p values <0.05 were considered significant and the information was stored and analyzed in SPSS version 23. Results. The phenotype found most frequently was ccee, which corresponded to 92%; the other phenotypes were found in lower percentages distributed as follows: Ccee 5.9%, ccEe 1.2%, CCee 0.3%, and CCEE 0.2%. 88% of the donations were made by male donors and the ABO blood group with the highest frequency was found to be O corresponding to 66.4%. Conclusion. Both nationally and globally, the most frequent phenotype for Rh D negative people is ccee, with a slight variation in their percentage of repetition between regions.

Método de inmunocomplejos específicos para detectar ADN del virus de hepatitis B en pacientes con antigenemias bajas

Se evaluó la influencia de las concentraciones de las partículas asociadas con el virus de hepatitis B desde el punto de vista inmunológico mediante la formación de inmunocomplejos específicos (ICE), se determinó el DNA antes y después de formado el inmunocomplejo. Se utilizaron 10 muestras serológicas de pacientes portadores crónicos con antigenemia baja (menos de 1 mg/mL), a las que se les realizó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (RCP) para detección del ADN viral. A cada muestra se le aplicó la técnica de ICE mediante un estándar de anticuerpos para su formación in vitro, se realizó una purificación con fenol cloroformo para ser procesado por RCP. La amplificación de las muestras con inmunocomplejos demostró que la técnica de ICE poseía capacidad de concentrar el antígeno y éste pudo ser detectado cuando no era posible determinar las concentraciones en una electroforesis de agarosa.

We evaluated the influence of the concentrations of particles associated with Hepatitis B virus from the immunologic viewpoint through the formation of specific antibody-antigen complexes, and also we determined DNA before and after the formation of the complexes. We used 10 serological samples of chronic carrier patients with low antigenemia(less than 1µg/mL) which were subjected to PCR for detecting viral DNA. The antibody-antigen complex technique was used in each sample through standard antibodies for the complex to be formed in vitro, then purification with phenol chrololform to be PCR-processed. The amplification of samples with the antibody-antigen complexes showed that this technique was able to concentrate antigens, so it could be detected when it was impossible to determine antigen concentrations in an agar electrophoresis.